水耐熱大腸菌群檢測

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水中耐熱大腸菌群檢測的重要性

耐熱大腸菌群（Thermotolerant Coliforms）是水質(zhì)安全評價的重要指標(biāo)之一，其存在直接反映了水體受到糞便污染的可能性。這類細(xì)菌能夠在44.5℃的高溫環(huán)境下生長，主要包括大腸埃希氏菌（Escherichia coli）等典型腸道致病菌的指示微生物。由于耐熱大腸菌群與人類和動物腸道病原體的傳播密切相關(guān)，其檢測在水源地保護、飲用水處理、污水處理效果評估及環(huán)境監(jiān)測中具有關(guān)鍵意義。若水體中耐熱大腸菌群超標(biāo)，可能引發(fā)腹瀉、腸道感染等公共衛(wèi)生事件。因此，建立科學(xué)、準(zhǔn)確的檢測方法并嚴(yán)格執(zhí)行相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，是保障水質(zhì)安全的核心環(huán)節(jié)。

檢測項目與目標(biāo)

耐熱大腸菌群檢測的核心目標(biāo)是定量分析水樣中該類菌群的濃度，通常以“每100毫升水樣中菌落形成單位（CFU/100mL）”表示。檢測項目包括：

• 總大腸菌群與耐熱大腸菌群的區(qū)分檢測；
• 特定菌種（如大腸埃希氏菌）的確認(rèn)；
• 污染來源的初步判斷（如人類或動物糞便）。

常用檢測儀器

規(guī)范的實驗室檢測需配備以下儀器設(shè)備：

• 恒溫培養(yǎng)箱：用于多管發(fā)酵法或濾膜法的菌群培養(yǎng)（44.5℃±0.5℃）；
• 紫外可見分光光度計：比色法檢測酶反應(yīng)產(chǎn)物；
• 濾膜過濾裝置：配合0.45μm孔徑濾膜進行菌群富集；
• 生物顯微鏡：菌落形態(tài)學(xué)觀察與驗證；
• 自動菌落計數(shù)儀：提升濾膜法檢測效率。

主要檢測方法

通用的檢測方法包括三種技術(shù)路線：

1. 多管發(fā)酵法（MPN法）

通過系列稀釋水樣接種于乳糖培養(yǎng)基，經(jīng)初發(fā)酵（37℃）、復(fù)發(fā)酵（44.5℃）兩階段培養(yǎng)，根據(jù)產(chǎn)酸產(chǎn)氣現(xiàn)象計算概率值。該方法靈敏度高，適用于渾濁水樣，但耗時長（48-72小時）。

2. 濾膜法

將水樣經(jīng)濾膜過濾后，轉(zhuǎn)移至選擇性培養(yǎng)基（如M-FC培養(yǎng)基），44.5℃培養(yǎng)24小時，直接計數(shù)藍色菌落。此方法操作簡便、結(jié)果直觀，但對濁度高的水樣需預(yù)處理。

3. 酶底物法（快速檢測法）

利用β-葡萄糖醛酸酶特異性反應(yīng)，在24小時內(nèi)通過顏色變化或熒光信號判斷結(jié)果。該方法無需確認(rèn)實驗，適合應(yīng)急監(jiān)測與現(xiàn)場快速篩查。

檢測標(biāo)準(zhǔn)與規(guī)范

國內(nèi)外主要技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)包括：

• ISO 9308-1:2014：濾膜法與液體培養(yǎng)基法的通用標(biāo)準(zhǔn)；
• EPA 1103.1：美國環(huán)境保護署酶底物法標(biāo)準(zhǔn)流程；
• GB/T 5750.12-2023：中國生活飲用水標(biāo)準(zhǔn)檢驗方法，涵蓋多管發(fā)酵法和濾膜法；
• HJ 347.2-2018：中國地表水環(huán)境質(zhì)量監(jiān)測技術(shù)規(guī)范。

根據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）指南，飲用水耐熱大腸菌群應(yīng)“零檢出”，娛樂水體限值≤200 CFU/100mL，農(nóng)業(yè)灌溉水需≤1000 CFU/100mL。檢測過程需嚴(yán)格執(zhí)行質(zhì)控要求，包括空白對照、陽性對照及平行樣檢測，確保數(shù)據(jù)可靠性。